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  流式细胞术分选服务规程

FACS.JPG


负责人 马清华
E-mail
qingqingma20@163.com

电话 13212429768
地点 西南医院科技中心楼四楼西南癌症中心
 
 
一、设备简介
    该流式细胞仪为美国BD公司的BD FACSAriaII cell sorter,配有三种激光光源,
波长分别为488nm、633nm和375nm。
二、分选准备
    使用者可根据需要使用各种不同的实验流程,如抗体荧光标的标定(antibody labeling)或荧光基因转染(transfection)。上机前必须完成下列程序:
    1. 样品必需事先使用尼龙过滤网过滤。若未过滤样品即上机而引起机器堵塞及损坏,需负赔偿责任。各种细胞建议浓度如下表。
           Cell                               Concentration
Lymphocytes,thymocytes,splenocytes (直径8-12 μm)     2千万/ml
Activated lymphocytes,small cell lines (直径12-20 μm) 1-2千万/ml
Large adherent cell line (直径>20 μm)        1千万/ml
    2. 如细胞分选后需再次培养(无菌分选),请准备含合适培养液的收集管,分选前交操作员。
建议15ml的离心管中加入6ml含有抗生素的培养基,或在5 ml离心管中加入 2ml的培养基当细胞分选时的垫底液。
    3. 若欲分选GFP、DsRed单色基因转染的样品,
需提供未经转染的相同细胞为控制组标本,以作为分选前机器校正用。
    4. 若以多种荧光染色进行分选,需提供各种单一荧光染色的标本作为分选前校正用。
    5. 本服务项目以无菌分选为主,希望保证所提供样品的无菌性
 
流式细胞仪分选服务流程


步骤一:预约申请
    1. 申请登记:提前一周在工作日时间内办理预约申请手续,填写预约申请表,交付押金。
    2. 提前一天预约实验时间:中午不休息,周一上午8:00-10:00周五下午15:00-18:00机器维护时间。
    3. 由于一天内有多个人预约分选,为避免激光器空开并防止影响到下一个使用者的权益,请预约者务必准时上机,未能在预约时间开始前的将样品准备好上机,对外服务的项目将按照预约时间进行计时收费。
    4. 取消预约:请于预约时间前3小时取消预约,否则记一次违约。
    5. 同一个使用者若违约累计3次,则暂停使用流式细胞服务一个月。


步骤二:先用分析型流式细胞仪确认样本。
    1.  本仪器主要的服务项目为细胞分选
    2. 建议事先使用FACS Calibur, FACS Canto或其他流式细胞仪去确认细胞阳性细胞的荧光比例。


步骤三:填写流式分选服务申请表(附件提供下载)

    请认真填写申请表相关信息,并在申请表的背面贴上流式细胞仪分析资料,在细胞分选时带给流式工作人员。

下载:流式细胞术细胞分选预约申请表
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Email:blk@swhospital.com